La transfección consiste en la
introducción de material genético externo en células eucariotas. El material
génico de interés puede insertarse en plásmidos o partículas víricas. Las
principales diferencias entre uno y otro son la cantidad de material genético
que podemos insertar en las células huéspedes y la forma de introducir el
material genético en la célula.
Mientras el vector viral tiene un
tamaño bastante limitado, que puede variar en función del tipo de virus que
utilicemos, el uso de plásmidos nos permite insertar varios genes en un mismo
vector. La otra gran diferencia es el método de inserción del ADN,
mientras el uso de vectores virales
permite que el propio virus inserte el ADN en la célula huésped, el uso de
plásmido requieres de herramientas para insertar el ADN.
Las técnicas más comunes
utilizadas en los laboratorios para transfectar plásmidos son: generación de
pequeños poros en la membrana celular que permitan la entrada del vector. Bajo
esta modalidad tenemos la electroporación (los poros los genera una corriente
eléctrica) o el Cloruro Cálcico. Otra técnica habitual es el uso de liposomas,
es decir vesículas lipídicas que envuelven el plásmido y se fusionan con la
membrana permitiendo la entrada del material genético (como por ejemplo la
Lipofectamina).
Otra herramienta que está
obteniendo muy buenos resultados es la conocida “Gen Gun” (pistola génica) o
Biolística en la que el ADN se junta a una nanopartícula compuesta por algún
sólido inerte, comúnmente partículas de oro o plata, que literalmente son disparada a través de un
gas a presión como el helio, directamente en el núcleo de la célula diana.
Desde su invención a mediados de
los años ochenta fue utilizada inicialmente para investigación en el área de
células de organismos vegetales, sin embargo tiene mucho potencial de uso en
animales modelo y tejidos humanos, como por ejemplo para la implementación de
vacunas, estudio a nivel de cultivos celulares, investigación en modelos
animales a nivel de enfermedades neurodegenerativas, entre otros. Al respecto
puede resultarle de interés el recién publicado artículo: “Transformation
of nuclear DNA in meristematic and
embryogenic tissues” (Sujatha M, Visarada KB. Methods Mol. Biol. 2013;940:27-44. PMID: 23104331).
Por último les comentamos que, como suele tenernos acostumbrados Biorad, desde su página web podemos ver pequeños seminarios sobre las técnicas anteriormente descritas y sobre todo y más interesante sobre la “Gene Gun”: http://www.biorad-ads.com/09-0804_educational_tools/genegun/ggfrmst.htm
Para conseguir éste, como otros
productos relacionados en el mercado de Biorad que sean de su interés, pueden
ponerse en contacto con nosotros.
